淀粉氮含量测定详细流程
淀粉类样品定氮检测,最重要的环节是淀粉样品消化过程,消煮过程控制好升温速率,适量加入双氧水来加快消煮能更好更快速的完成消煮实验。试验证明,采用凯氏定氮仪测定相比传统的标准方法测定更方便,能加快实验的效率。接下来就让我们一起来学习一下淀粉氮含量测定的详细步骤吧!
一、取样:
称取10g淀粉样品,精确至0.0001g,然后倒入干燥凯氏烧瓶内,注意不要将样品沾在瓶颈内壁上。对粘状或糊状样品,则可用一个小玻璃盛器或不产生氮的铝片纸或塑料上称重,或氮含量已知的盛器,盛品留在瓶内,如盛器产生氮的话,应做空白测定后折算。
二、消煮
加入催化剂10g,并用量筒加入体积为4倍样品重量计算的毫升浓硫酸。轻轻摆动烧瓶,混合瓶内样品,直至团块消失,样品完全湿透,加入防沸物(如玻璃珠)。烧瓶放到消化架上,装上排气装置,开始加热裂解。小心加热液体,使之逐渐沸腾,待液体澄清后继续加热1小时。
三、试样处理:
①使用滴管称取约2g左右的淀粉样品,15ml浓硫酸,2g左右的催化剂(硫酸铜硫酸钾),静置半小时。
②放置于消煮炉上,正常升温至100℃(开始变黑)。
③100℃持续10分钟,升至150℃(完全变黑,并开始出现泡沫)。
④升温至200℃过程中,同时加入10滴30%的过氧化氢溶液。
⑤200℃稳定5分钟,加入10滴30%的过氧化氢溶液。
⑥升至250℃,同时加入10滴30%的过氧化氢溶液。
⑦稳定10分钟,升至300℃,同时加入5滴30%的过氧化氢溶液。
⑧稳定10分钟,升至400℃,同时加入5滴30%的过氧化氢溶液。
⑨间隔10分钟加入5滴30%的过氧化氢溶液,直至溶液中固体(黑色泡沫)完全溶解。
⑩等待溶液变为透明的蓝绿色时继续加热1小时。
四、测定:
消解完之后将样品冷却至室温,即可使用凯氏定氮仪测定凯氏氮含量,得到的氮含量乘以相对应的系数可得到蛋白质的含量。