分光光度法和叶绿素计测定法之比较

叶绿素含量的测定，历来是实验室的重点实验之一，因为叶绿素含量的多少，可以直接现实植物的生长状况，另外，叶绿素含量的参数SPAD，也能够显示土壤中氮肥的含量，指导土壤的施肥。通过便携式叶绿素仪对植物叶绿素含量的评估，我们能够节约20%的氮肥用量，也在一定程度上保护了环境。那么如何测定植物叶片的叶绿素含量呢？下面我们来介绍下分光光度法和叶绿素计法。

分光光度法：需要的仪器设备：分光光度计、电子顶载天平（感量0.01g）、研钵、棕色容量瓶、小漏斗、定量滤纸、吸水纸、擦境纸、滴管；试剂：96％乙醇（或80％丙酮）；石英砂；碳酸钙粉。具体方法如下：取新鲜植物叶片（或其它绿色组织）或干材料，擦净组织表面污物，剪碎（去掉中脉），混匀。2. 称取剪碎的新鲜样品0.2g，共3份，分别放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及2～3ml95％乙醇，研成均浆，再加乙醇10ml，继续研磨至组织变白。静置3～5min。3. 取滤纸1张，置漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过滤到25ml棕色容量瓶中，用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。4.用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至25ml，摇匀。5.把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95％乙醇为空白，在波长665nm、649nm下测定吸光度。然后根据相应的公式，代入就可计算得到叶绿素的值。

叶绿素计法：叶绿素计测定植物叶片的绿色程度，相当方便快捷，而且对叶片不会造成损害。你只许将叶片夹在仪器中间，然后按下仪器开关，不出两秒，就能够得到叶片的SPAD值，即植物的叶绿素含量。因为测出的结果是用SPAD值表示，因此该款仪器又叫做SPAD502叶绿素仪，其中SPAD502为型号。SPAD502叶绿素仪大大节约了测定叶绿素含量的时间和步骤，为我们了解植物的生长状况，以及提供施肥方案，带来了极大的便利。而且用该仪器的精确度，并不比用分光光度法低，因此，在很多农业部门、大专院校，都会选择一款适合的叶绿素计，来测定植物的叶绿素含量，或者作为其他方法测出叶绿素含量值的参照。