叶绿素测定仪研究枣树品种试管苗叶绿素含量的变化
来源： http://www.grainyq.com/ 类别：实用技术 更新时间：2013-01-18 阅读次
【本资讯由中国粮油仪器网提供】 试管苗与正常的栽培苗有什么区别呢？我们要从对其影响很大的叶绿素研究，借用叶绿素测定仪，我们研究分析一下枣树品种试管苗叶绿素含量的变化，以下是操作步骤和结果。
叶绿素是与光合作用有关的最重要的色素。叶绿素不溶于水，但能溶于酒精、丙酮等有机溶剂。叶绿素测定仪是根据植物的叶绿素对光线吸收的高峰主要集中在红光区和蓝光区、而对绿光区和红外光区很少吸收的特性制作而成。它可以通过植物的“绿色度”来判别植物叶片叶绿素的相对含量，从而可以了解植物真实的硝基需求量，并可帮助了解土壤硝基的缺乏程度，判断是否过多地施加了氮肥。枣树组织培养苗在增殖阶段一般采用MS全盐培养基，而在生根过程中采用1／2MS或者H培养基，这两种培养基的硝酸盐含量均较低；而陕北地区的黄绵土中硝基含量更是比培养基中的还低。枣树试管苗生根后一般经过炼苗后移栽才能先进入大棚，再转入大田。大田苗的枝条可直接经扦插进入大田。两者之间有着很大的差异。本文通过对枣树组培苗（继代和生根）叶绿素和大田苗叶绿素含量的差异研究，以期为研究枣树人工繁育和自然繁育对枣树生活能力的差异影响提供依据。
试验所用的枣树品种分别是狗头枣、木枣、晋枣，各品种的试管苗叶片取自陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心的组培与育种实验室；各品种的大田苗叶片取自陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心的苗木品种示范园成年株。分别随机选取在MS培养基中生长了25d的狗头枣、木枣、晋枣试管继代苗叶片和在1／2MS培养基中培养了25d的生根苗叶片各50片；在示范园中选取同一枣吊相对位置接近的狗头枣、木枣、晋枣叶片各50片。每张叶片随机选取6个点，用叶绿素测定仪测量叶绿素的相对含量。试管苗的测量在室内日光灯开启前，大田苗的测量在早晨日出前进行。活体测量完后的叶片用丙酮－乙醇提取法测量其总叶绿素含量。数据处理依据统计学原理，用Excel2003软件进行分析。
采用两种方法对枣树叶绿素的含量进行了测定，其中丙酮－乙醇提取法已有不少研究者使用过，如李保国等对灰枣等10个枣树品种的叶绿素含量做了测定，结果表明，所测枣树的叶绿素含量在2.52～4.43mg•g-1之间。葛晓霞等对骏枣脱毒苗叶绿素的含量做了研究，发现脱毒苗叶绿素的含量大于原种苗的。梁建萍等对胁迫条件下枣树的叶绿素含量进行了测定。徐伟红等对枣树叶绿素的荧光参数日变化做了探讨。杨敏文对叶绿素测定的不同方法做了研究，认为丙酮－乙醇提取法速度快，叶绿素得率高，稳定性好，精密度高。艾天成等用叶绿素测定仪法对小麦的叶绿素含量做了研究，认为该方法快速准确稳定性好。但是，叶绿素测定仪法在枣树上的应用尚属首次。
枣树叶绿素含量变化3个枣树品种从试管继代苗到大田苗均出现叶绿素含量从低到高的变化。而且在大田苗中表现为木枣、晋枣用两种方法测量的叶绿素含量均大于狗头枣的现象。该现象可能与这3个品种枣树的适应性有关，晋枣、木枣在陕西、山西等地均有分布，而狗头枣仅在陕西延川一带有少量分布。从试管苗到大田苗，枣树由营养异养型转变为营养自养型，而自养条件下叶绿素的含量高于异养的，在这一过程中，培养基中铵态氮和硝态氮的含量降低、绿素含量升高这一现象有待进一步研究。进行试管苗叶绿素含量的研究成果，叶绿素测定仪功不可没，现在这类仪器在进行科研时候，应用起来特别的方法，比如说测量脂肪含量的脂肪测定仪，和测量叶绿素的仪器一样，都是傻瓜式操作，直接按钮就可以，极大的提高了研究速度。
叶绿素是与光合作用有关的最重要的色素。叶绿素不溶于水，但能溶于酒精、丙酮等有机溶剂。叶绿素测定仪是根据植物的叶绿素对光线吸收的高峰主要集中在红光区和蓝光区、而对绿光区和红外光区很少吸收的特性制作而成。它可以通过植物的“绿色度”来判别植物叶片叶绿素的相对含量，从而可以了解植物真实的硝基需求量，并可帮助了解土壤硝基的缺乏程度，判断是否过多地施加了氮肥。枣树组织培养苗在增殖阶段一般采用MS全盐培养基，而在生根过程中采用1／2MS或者H培养基，这两种培养基的硝酸盐含量均较低；而陕北地区的黄绵土中硝基含量更是比培养基中的还低。枣树试管苗生根后一般经过炼苗后移栽才能先进入大棚，再转入大田。大田苗的枝条可直接经扦插进入大田。两者之间有着很大的差异。本文通过对枣树组培苗（继代和生根）叶绿素和大田苗叶绿素含量的差异研究，以期为研究枣树人工繁育和自然繁育对枣树生活能力的差异影响提供依据。
试验所用的枣树品种分别是狗头枣、木枣、晋枣，各品种的试管苗叶片取自陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心的组培与育种实验室；各品种的大田苗叶片取自陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心的苗木品种示范园成年株。分别随机选取在MS培养基中生长了25d的狗头枣、木枣、晋枣试管继代苗叶片和在1／2MS培养基中培养了25d的生根苗叶片各50片；在示范园中选取同一枣吊相对位置接近的狗头枣、木枣、晋枣叶片各50片。每张叶片随机选取6个点，用叶绿素测定仪测量叶绿素的相对含量。试管苗的测量在室内日光灯开启前，大田苗的测量在早晨日出前进行。活体测量完后的叶片用丙酮－乙醇提取法测量其总叶绿素含量。数据处理依据统计学原理，用Excel2003软件进行分析。
采用两种方法对枣树叶绿素的含量进行了测定，其中丙酮－乙醇提取法已有不少研究者使用过，如李保国等对灰枣等10个枣树品种的叶绿素含量做了测定，结果表明，所测枣树的叶绿素含量在2.52～4.43mg•g-1之间。葛晓霞等对骏枣脱毒苗叶绿素的含量做了研究，发现脱毒苗叶绿素的含量大于原种苗的。梁建萍等对胁迫条件下枣树的叶绿素含量进行了测定。徐伟红等对枣树叶绿素的荧光参数日变化做了探讨。杨敏文对叶绿素测定的不同方法做了研究，认为丙酮－乙醇提取法速度快，叶绿素得率高，稳定性好，精密度高。艾天成等用叶绿素测定仪法对小麦的叶绿素含量做了研究，认为该方法快速准确稳定性好。但是，叶绿素测定仪法在枣树上的应用尚属首次。
枣树叶绿素含量变化3个枣树品种从试管继代苗到大田苗均出现叶绿素含量从低到高的变化。而且在大田苗中表现为木枣、晋枣用两种方法测量的叶绿素含量均大于狗头枣的现象。该现象可能与这3个品种枣树的适应性有关，晋枣、木枣在陕西、山西等地均有分布，而狗头枣仅在陕西延川一带有少量分布。从试管苗到大田苗，枣树由营养异养型转变为营养自养型，而自养条件下叶绿素的含量高于异养的，在这一过程中，培养基中铵态氮和硝态氮的含量降低、绿素含量升高这一现象有待进一步研究。进行试管苗叶绿素含量的研究成果，叶绿素测定仪功不可没，现在这类仪器在进行科研时候，应用起来特别的方法，比如说测量脂肪含量的脂肪测定仪，和测量叶绿素的仪器一样，都是傻瓜式操作，直接按钮就可以，极大的提高了研究速度。
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