如何将茶叶中的农药进行溶解提取
茶叶,可以说是中国的一种象征,也是我国文明古国的一种代表,在我国外贸中独占一角,不过随着现代科技的发展,农药被发明以后,我国茶叶出口受到很大的阻碍,农药残留超标,根据有关部门研究,经对其自行采集的18份茶叶样品送交第三方检测发现,每种均含有至少3种农药茶残留,其中12份茶叶样本检出违法违禁农药残留。所以,对泡茶的过程中茶叶中农药溶出的研究就显得十分重要。目前,针对农药残留的检测主要分农药残留速测仪法、气相色谱法、气相质谱法、液相色谱法、液相色谱质谱联用法,本研究主要使用液相色谱质谱联用仪对茶叶中可能含有的多种农药建立分析方法,建立泡茶模型,绘制残留农药在水中溶出曲线,以期为茶叶中农药在水中状态研究提供科学依据。
采用相关仪器进行农药溶解情况研究,主要仪器有:高效液相色谱仪;三重四极杆/线性离子阱串联质谱仪;AE163型天平(0.1mg);超纯水设备;漩涡混合器;恒温水浴振荡器;超声清洗仪;低温高速离心机;微孔滤膜为0.22μm。阿特拉津、利谷隆、异丙甲草胺r、环嗪酮、敌草隆、去乙基莠去津l、绿麦隆;乙腈、甲酸、水等(均为色谱纯);乙酸乙酯、环己烷(色谱纯)。
我们在进行溶解茶叶农药的时候,一定要按照以下步骤进行:准确称取各标准品5mg乙腈溶解至5mL为标准储备液,4%避光保存(有效期3个月);取各标准品储备液混合配制工作液,标准工作液使用体积分数95%的乙腈水溶液稀释至质量浓度0.05,0.1,0.5,1.0,5.0,10.0ng/mL,现用现配。取2g茶叶(精确至0.01g)加入50mL塑料离心管中,加入20mL水,涡动0.5min,静置30min,以转速5000r/min离心5min,取上清液,为样品提取液1。再次向离心管中加入20mL水,涡动0.5min,静置30min,以转速5000r/min离心5min,取上清液,为样品提取液2。重复操作,直至6次,分别标记样品提取液3—6。样品提取液依次用正己烷—乙酸乙酯混合溶剂5mL(体积比为1∶1)液液萃取,取有机层。将有机层于40℃下氮气吹干,加入0.5mL的体积分数95%的乙腈水溶液溶剂溶解。过0.22μm滤膜,待质谱分析。柱温:40℃;进样体积:10μL;流动相:A为含0.1%甲酸的5%乙腈水溶液,B为含0.1%甲酸的95%乙腈水溶液;梯度洗脱。洗脱程序:初始时5%B维持1min,1~7min时5%B线性增加至70%,7.5min时B增加至95%,维持4.5min后0.5min线性递减至5%,维持2.5min,整个分析过程15min;流速:250μL/min。多反应监测(MRM)扫描模式,ESI离子源;CurtainGas流量为20mL/min,Gas1流量为50mL/min,Gas2流量为50mL/min,辅助加热气温度为550℃,涉及气体均为N2。7种农药的质谱参数见表1。
试验中色谱柱选择C8柱,尽可能将色谱峰分离开,所以初始流动相中有机相的比例较低,使化合物保留在色谱柱上。试验表明,初始流动相中乙腈相比例为5%,采用梯度洗脱程序,各化合物的峰型最优。质谱条件的优化:母离子扫描模式找到7种化合物的母离子信号,子离子扫描采集对应每种化合物的子离子全谱,选择子离子全谱中丰度最高的2个子离子分别作为定性、定量离子。利用软件自动优化去簇电压、碰撞能量等质谱参数,以及FIA自动优化离子源参数,得到最为理想的质谱条件。7种农药MRM扫描模式下采集XIC色谱见图1。方法的线性范围、检出限、定量下限及回收率利用MRM扫描模式对7种农药不同浓度工作曲线采集得到的离子对色谱峰进行积分,在0.05~10ng/mL内呈良好的线性关系,所有化合物线性相关系数均>0.99。通过空白样品中添加目标化合物的方法,按样品处理方法进行处理和检测,当质量浓度0.01ng/mL时信噪比均大于10(S/N,按照噪音3倍标准偏差计算,下同)。由于实际样品中基质复杂程度不同,所以适当放大检出限LOD,认定此时为方法的检出限。同样,当质量浓度为0.05ng/mL时信噪比大于25,认定此时为方法定量限。
本文针对含有7种农药的茶叶在水中溶解情况进行研究,建立7种农药的检测方法,得到检出限低、结果准确、重现性好的试验方法。通过试验数据的收集,证实泡茶过程中洗茶是非常重要且必不可少的步骤,有助于减少人们受到农药残留的危害。