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分子中蛋白质折叠的影响

来源: http://www.grainyq.com/  类别:实用技术  更新时间:2014-09-28  阅读
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蛋白质是构成生命体的基本物质,人们很早就认识到蛋白质的功能,我们在很多蛋白质的研究中发现只有蛋白质测定仪在实验中是用处最大的一款仪器,可以节省很多的时间和精力。但是要完全阐明蛋白质发挥功能的机制通常需要它的信息结构,这些信息结构不仅仅为其单独发挥功能提供依据,也为蛋白质 - 蛋白质相互作用提供了结构学上的依据。研究蛋白质折叠的过程,尤其是折叠的早期过程,即新生肽段的折叠过程是最终全面阐明中心法则的一个根本问题。在这一领域中,近年来的新发现对新生肽段能够自发进行折叠的传统概念做了根本的修正。在生命科学的基础研究中,分离、提纯蛋白质是重要而繁锁的工作。生物体中各种蛋白质的氨基酸组成(或构筑)不尽相同。鉴定纯蛋白的最基本方法之一是测定其氨基酸的组分及含量。

几年来,我们对一些蛋白质样品 (达电泳纯)进行氨基酸分析,为鉴定蛋白质的结构与纯度提供了一项指标。有些蛋白质是国内首次提取或报道。鉴定蛋白质的性质与纯度,需要分析氨基酸的组成及含量。氨基酸分析定量准确程度与蛋白质的水解条件至关重要。我们在双蒸水与优级纯盐酸共沸而蒸得的5.7mol/L 盐酸水解浪中加入适量苯酚和琉基乙酸,能有效防止酪氨酸、甲硫氨酸等易氧化组分的破坏。氨基酸分析也是探讨蛋白质结构与功能关系的途径之一。这些关系各器官功能的活性蛋白质,氨基酸组成各有其特点。将分析数据输入电脑,用自编程序,可以按标准模式绘制出各蛋白质的氨基酸组成的特征图像,便于鉴别。

在分离纯化重组 DNA 技术基因工程表达产物时,很多利用大肠杆菌为宿主细胞的外源基因表达产物在细胞内聚集成没有生物活性的固体颗粒包含体。这些基因表达产物的一级结构虽然正确,但其立体结构是错误的,所以没有生物活性。因此,为获得天然状态的目标产物,必须在分离回收包含体后,溶解包含体并设法使其中的目标蛋白质恢复应有的天然构象和活性。分子伴侣帮助变性蛋白质正确折叠的功能为解决上述困难提供了可能。近来利用固定化分子伴侣 GroE,研究了其对变性溶菌酶的复性作用,解决了分子伴侣的重复利用问题。有研究表明,分子伴侣在疾病诊断、环境检测、物种鉴定、肿瘤治疗、生物产品开发、农作物育种等方面都有十分广阔的应用前景。总之,分子伴侣的研究成果必然会大大加深我们对生命现象的认识,同时也一定会增强我们与自然斗争的能力和自身生存的能力。中国粮油仪器网  http://www.grainyq.com/

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