真空吸种置床仪对葡萄种子的培养分析
葡萄种子的发芽率是影响葡萄产量以及口感的一个重要原因,同时由于葡萄有种皮所含抑制物质及机械障碍,即使有成熟胚也难以萌发,但若将成熟胚取出在培养基上萌发,则会提高萌发率且可省去低温处理过程。因此我们设计了使用真空吸种置床仪对葡萄种子培养进行胚发育,再结合胚培养以提高萌发率的方法,获得了较好的结果。
l 材料与方法
试验于2004~2005年在西北农业大学进行,试材为欧洲葡萄极早熟品种莎巴珍珠。
用0.1%升汞水溶液将果实表面消毒10分钟,无菌水冲洗3~5次,于无菌条件下肺剖出种子,在培养基上培养。所用基本培养基为MS+5%蔗糖十0.6%琼脂十LH100ppm.
种子培养结束后解剖出胚,在显微镜下测量胚长,作为处理物劣的指标。从基本培养基上培养二个月的种子中取出胚进行培养。胚培养所用基本培养基为胚萌发标准是子叶张开并转绿。培养基pH均调至5.8,培养温度为25士1℃。种子培养在室内自然散射光下进行,胚培养用日光灯作光源,光强2000一3000勒克斯,每日光照15小时。
2 结果与讨论
2.1影响种子培养的因素
2.1.1取样时期于莎巴珍珠果实成熟前一周、成熟期及成熟后一周各取样(种子)一次,培养二个月后测量胚长。结果表明,成熟前一周取样的效果最好,培养后的胚长极显著地大于成熟期和成熟后一周取样的结果,而成熟期及成熟后一周取样经培养,其胚长间无显著差异(见表1)。在种子培养过程中,随着胚长的增加,胚的形态发育也渐趋成熟。取样时期对胚的形态发育也有明显影响(表2),如成熟前一周取样,培养后胚的形态分布集中,以子叶胚为主,占70%,而另两次培养的其胚形态发育不整齐,心形胚、鱼,雷形胚和子叶形胚比例相近。
2.1.2种子培养持续天数莎巴珍珠果实成熟时胚长为592卜m,此时取样的种子培养30,60和90天后,胚长分别达844,953及929协m,均极显著地大于培养前的胚长,但它们之间则没有显著差异。这说明培养3.天已足够,若再延长培养时间,则胚长增加不明显。
2.1.3培养基中蔗糖浓度的影响于莎巴珍珠果实成熟时取样的种子分别培养在基本培养基附加2,5,10和20%蔗糖的培养基上,二个月后测量胚长。在这四种蔗糖浓度的培养基一匕胚的生长随着蔗糖浓度的增加而受到抑制。在2%蔗糖培养基上培养后胚长最大,而在20%蔗糖培养基上胚的生长完全受到了抑制。胚的形态发育亦随着蔗糖浓度的降低而得到促进,如在2%蔗糖浓度培养基上胚的形态以子叶胚为主,而在20%蔗糖浓度培养基上则以心形胚为主。
