生物体是一个比较复杂的有机物体，物质的运动都是靠生物体内的一些蛋白质在进行维持，因此蛋白质的含量成为我们研究生物体的主要路径。以前我们都是通过比较传统的方法的，但是存在着很多的弊端，经常会产生一些误差，为了避免这些问题，我们已经改用蛋白质测定仪了，结构原理都是比较简单的，主要还是比较便宜，价格方面大家都是能够接受的。基于生物化学、微生物学、分子生物学、生物物理学和生物信息学的知识和技术，已经建立了多种研究蛋白质相互作用的方法。

由于 GFP 结构紧密，不易被蛋白酶水解，无毒，不需要借助其他辅酶，在厌氧细胞以外的任何细胞中都能自我催化发射荧光，所以在细胞生物学和分子生物学领域中常常作为活体报告基因与拟研究的蛋白质基因相融合，从而可以观察所研究蛋白质在细胞内的定位、运动等。最初 GFP 融合到目标蛋白的方式主要有: N-端融合、C - 端融合或将整个荧光蛋白融合到目标蛋白中。在哺乳动物细胞内利用双分子荧光互补研究蛋白质间的相互作用是应用最广的。成熟的蛋白质必须在细胞特定的部位才能发挥其生物学功能。利用 BiFC 能够获取蛋白质相互作用复合物在细胞中的定位信息，为推断蛋白质的生物学功能提供必要的基础。

现行的 BiFC 是一种有力的实验工具，该技术可以用于转录因子间的互作、酶-底复合物的确定、信号转导级联、蛋白转录后修饰互作等方面的研究，还可以利用多彩的BiFC系统在1个细胞内研究多种蛋白质间的相互作用。该技术耗时比较短，可以在多种细胞内进行，所研究的蛋白质处于天然的环境并且能够直接报道蛋白质相互作用在细胞中发生的位置。但是该系统也存在缺陷: 多个 BiFC 系统对温度敏感，目前只有基于 Venus 和 Critrine 的两个黄色 BiFC 系统可以在生理温度条件下试验片段互补。另外，融合蛋白必须为可溶性表达，表达量过高会引起非特异性。中国粮油仪器网  http://www.grainyq.com/